微流控流式细胞仪作为细胞分析领域的革新性工具,其核心技术贯穿流体操控、光学检测与信号处理全链条,通过微米级流体通道与高精度检测系统的协同,实现了对单细胞的快速、精准分析。
流体操控技术是微流控流式细胞仪的基础。其核心在于利用微米级通道的流体动力学特性,通过鞘液包裹与流速差控制,将细胞悬液聚焦成单细胞流。例如,微毛细管技术通过负压区形成稳定的单细胞上行流,确保每个细胞独立通过检测区域,最小样本量可低至1000个细胞,且运行8小时仅产生50ml废液。此外,声电泳(AP)、介电泳(DEP)等主动聚焦技术进一步提升了细胞排列的精确性,为后续检测提供稳定信号源。
光学检测系统是细胞信息获取的关键。激光束垂直照射单细胞流,产生前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),分别反映细胞大小和内部颗粒度。例如,低SSC信号可区分淋巴细胞与高SSC的粒细胞。同时,系统集成多色荧光检测模块,通过带通滤光片(如690/50nm)精准匹配荧光染料激发/发射光谱,结合光电倍增管(PMT)或CMOS传感器,实现多参数同步检测,单细胞分析参数可达数十个。
信号处理与分析技术则赋予仪器智能化决策能力。芯片上集成的电子系统对散射光和荧光信号进行实时放大与模数转换,通过阻抗相位角-振幅散点图区分活细胞与死细胞,或利用深度学习算法自动化识别细胞亚群。例如,在癌症诊断中,系统可高通量检测循环肿瘤细胞(CTC),并通过阻抗数据快速量化肿瘤细胞活性,为治疗提供依据。
这些核心技术的融合,使微流控流式细胞仪在稀有细胞检测、床旁诊断及资源有限地区推广中展现出优势,成为精准医疗与生物医学研究的重要工具。